αPD-1-mesoCAR-T 细胞与每日阿帕替尼一起部分抑制患者晚期/难治性卵巢癌的生长

恶性卵巢癌是全球女性妇科癌症死亡的第二大常见原因。 上皮性卵巢癌（EOC）占所有卵巢恶性肿瘤的90%，超过75%的患者在诊断时处于晚期。 前期治疗主要依靠减瘤手术和铂类化疗，并在患者中加入抗血管生成药物。尽管进行了积极的手术和化疗，但大多数女性最终还是会死于这种疾病。1因此，有必要为晚期或难治性转移性卵巢癌患者开发新的有效治疗策略。

嵌合抗原受体 （CAR） 修饰的 T 细胞（CAR-T 细胞）在治疗复发/难治性 B 细胞白血病和淋巴瘤等血液肿瘤方面显示出良好的疗效。然而，CAR-T细胞、细胞治疗对实体瘤患者的反应仍然很差，因为理想的肿瘤特异性抗原很少见。间皮素 （MSLN） 是一种分化抗原，在卵巢癌中高表达，但在正常组织中低表达，通常与晚期 EOC 的化疗耐药和不良预后有关。5 在研究人员之前的研究中，靶向 mesoCAR-T 细胞在体外和体内显着抑制了 MSLN 阳性卵巢癌的生长。

在这里，研究人员报告了一例多线化疗后复发的患者的难治性EOC病例。

一名 54 岁女性最初被诊断为 IIIc 期晚期卵巢浆液性腺癌，并于 2015 年 9 月进行了减瘤手术。肿瘤组织免疫组化染色显示 CK7（+）、CA125（+）、WT-1（+）、EMA（+）、CAM5.2 （+）、ER（+）、PR（+++）、钙视网膜（部分+）、p53（+++）、Ki67（60%）、CD34（血管+）阳性，Her2、CK20、CA19-9、波形蛋白、CEA 和 HBME-1 阴性。在左输卵管染色中也观察到相同的病理特征。患者接受紫杉醇加顺铂的一线联合化疗 8 个周期，然后接受吉西他滨加奥沙利铂的二线化疗 4 个周期。直到 2017 年 8 月，MRI 在她的肝脏中发现了新的病变，才实现了疾病稳定 （SD）。然后，脂质体阿霉素加奈达铂给药六个周期。2018 年 3 月，CA125 升高并伴有肝病变扩大，并给予阿帕替尼（每天 250 毫克，po）。CA125 在处理后下降 ，她在 SD 中待了 8 个月。2018年10月，CA125升高。患者要求进行免疫治疗。通过MRI确认，肝脏中有两个可测量的结节，在肺和盆腔区域未发现转移性病变。4 种错配修复蛋白（MLH1、MSH2、MSH6 和 PMS2）正常表达，微卫星稳定。19个与肿瘤发生相关的常见基因也未发现突变。然而，MSLN（+++84%）染色在她的肿瘤组织中很强，因此患者被接受参加αPD-1-mesoCAR-T细胞疗法的临床试验。患者在开始单采术前签署了知情同意书。2018 年 12 月开始首次输注 CAR-T，2019 年 1 月开始第二次输注。

在这项研究中，患者在第 0 天和第 26 天通过静脉滴注接受 αPD-1-mesoCAR-T 细胞。CAR-T细胞输注前未给予淋巴细胞耗竭化疗。如前所述，通过qPCR检测外周血中CAR的拷贝数。英寸，第0天显示CAR-T产物的拷贝数为25.4拷贝/μg DNA。第一次输注后，第 5 天为 85.5 拷贝/μg DNA，第二次输注后达到峰值水平（198 拷贝/μg DNA）。在第 31 天，它下降到 46.1 拷贝/μg DNA。通过ELISA检测CAR-T细胞分泌的PD-1抗体。PD-1 抗原蛋白购自 Abcam （ab174035），并按照常规方案包被在板上。输注后PD-1抗体水平也升高并维持在恒定水平，支持αPD-1-mesoCAR-T细胞可以在体内扩增。

在CAR-T治疗期间，使用购买的细胞因子检测试剂盒（Saiji Biological Technology）通过流式荧光法测量细胞因子（IL-2、IL-4、IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和干扰素（IFN-γ）等细胞因子的血浆水平。显示IL-6在第一次输注后第8天增加，在第二次输注期间有两个峰值。高水平的 IL-6 反映了 CAR-T 细胞的活性和增殖，但未引起该患者严重的细胞因子释放综合征。除 IL-6 外，其他细胞因子从输注第 3 天到第 29 天略有增加，并在整个研究过程中保持在低水平。IFN-γ在第一次输注后第5天显着增加，并在治疗期间逐渐减少并保持在较高水平。第二次输注时IFN-γ略有增加。同时，TNF-α、IL-2和IL-4的模式与IFN-γ相似。

流式细胞术在CAR-T治疗前后对免疫细胞进行分析。治疗后白细胞总数变化不大，而淋巴细胞亚群发生了变化。CD8 T细胞增加至522和612个细胞/μl（第1个月和第3个月），而治疗前为352个细胞/μl，而CD4 T细胞减少至512个细胞/μl（第1个月和第3个月），而CAR-T治疗前为800个细胞/μl。结果表明，CAR-T细胞可能有助于增强CD8 T细胞的活性。+++

不良事件（AEs）根据不良事件通用术语标准（V.5.0）进行评估。患者有1级高血压和疲劳。未观察到其他症状，如发烧、发冷、呕吐和肌肉酸痛。

通过多模态肿瘤追踪使用长轴自动软件计算选定的测量值，对分段病灶进行定量。MRI显示治疗后肝病变缩小。结节 1 的直径从 51.9 mm 减小到 39.1 mm，而结节 2 从 19.4 mm 减小到无法检测到。根据实体瘤反应评估标准 V.1.1 实现部分反应 （PR）。患者无进展生存期 （PFS） 为 5 个月，存活期为 17 个月。首次输注CAR-T细胞后观察到CA125略有下降。虽然在第二次输注后再次上升，但并未超过第一次CAR-T治疗前的水平。观察3个月结束后，患者开始接受其他治疗。

结论

αPD-1-mesoCAR-T细胞疗法联合阿帕替尼对晚期难治性卵巢癌具有潜在的治疗效果。

文章翻译于《PMC》

αPD-1-mesoCAR-T cells partially inhibit the growth of advanced/refractory ovarian cancer in a patient along with daily apatinib - PMC (nih.gov)