基于全人源纳米抗体的工程化CAR T细胞增强了对肝细胞癌的抗肿瘤活性。

作者：小编更新时间：2023-12-20 点击数：

Glypican 3 (GPC3)是一种与早期发育相关的细胞表面蛋白，是肝细胞癌(HCC)的生物标志物。

在大量的研究中，从噬菌体文库中分离的人GPC3纳米体(VH) HN3被证明可以消除HCC肿瘤并阻断GPC3的远端Wnt结合结构域。迄今为止，如何精确地设计CAR-T细胞以提高实体肿瘤的疗效仍然是一个挑战。在肝细胞癌的背景下，研究人员确定了不同结构和大小的铰链和跨膜部分如何影响CAR-T细胞的功能。

研究人员生成并比较了含有HN3、CD8、CD28、IgG4和Fc结构域的GPC3靶向CAR-T细胞的多种排列。将HN3加入到多种CAR格式中产生了9个构建体，使用荧光素酶报告系统在Hep3B、Huh7和HepG2细胞系中筛选抗原特异性和抗原非依赖性信号。为了进行体内评估，研究人员给免疫缺陷NSG小鼠腹腔注射Hep3B或Huh7细胞，并用单剂量(500万或1500万)工程HN3 CAR-T细胞治疗。在第2、4和5周采集血液以评估增殖、T细胞亚型和衰竭。

体外HN3-IgG4H-CD28TM CAR-T细胞具有高特异性和细胞毒活性。在低(1.6:1)和高(25:1)效应靶比下，HN3- igg4h - cd28tm CAR-T细胞显著提高了30-40%的HN3细胞杀伤活性。同样，在体内，在高抗原环境下，铰链区和跨膜结构域的两个决定性变化导致携带HCC肿瘤的免疫缺陷小鼠在7-10天内完全根除肿瘤。此外，HN3-IgG4H-CD28TM CAR-T细胞通过与naïve T细胞亚群一起产生富集的细胞毒性记忆(Temra) CD8+的明确T细胞反应特征，维持了特异性的肿瘤杀伤并避免了衰竭。